Reação em cadeia da polimerase - PCR

Técnica de PCR, o que é, exemplo, aplicações, como ocorre

PCR: importante técnica genética
PCR: importante técnica genética

 

O que é (definição)

 

A técnica de PCR se baseia na amplificação – in vitro- de uma sequência única de DNA milhões de vezes.

 

Basicamente ela faz várias cópias do fragmento de interesse do DNA que será estudado.

 


Exemplo


Se olhássemos apenas para o DNA extraído de uma célula, seria extremamente difícil encontrar um fragmento de interesse; em outras palavras, seria quase impossível identificar aquela parte específica do DNA.

 

Simplificando ainda mais, pode afirmar que através da técnica de PCR é possível dar um “zum” e ver apenas aquela parte que interessa.

 

Aplicações


As aplicações da técnica de PCR são várias e nas mais diferentes áreas. Seguem alguns exemplos:

 

- Diagnóstico de doenças infecciosas e genéticas;

 

- Determinação de variabilidade genética;

 

- Sexagem de embriões;

 

- Estudo da expressão gênica;

 

- Investigação forense;

 

- Determinação de linhagem de animais;

 

- Identificação de patógenos, paternidade, etc.

 

Como ocorre


A PCR ocorre em três passos e todos eles dependem de um gradiente de temperatura.

 

1º passo: Desnaturação (a 95ºC) da dupla fita do DNA, que ocorre devido a elevação da temperatura.

 

2º passo: Anelamento (57ºC a 63ºC) dos primers, que pode ocorrer numa variação de temperatura entre 57ºC a 63ºC.

 

3º passo: Extensão (a 72ºC) com o funcionamento da Taq Polimerase, que auxilia na introdução dos nucleotídeos que irão complementar a cadeia que está sendo sintetizada.

 

Conclusão


Uma PCR normal tem por volta de 36 ciclos, sendo que cada um deles engloba os três passos acima descritos. E a cada ciclo ocorre a multiplicação ou amplificação exponencial da quantidade de moléculas de DNA.

 

Por exemplo, se no primeiro ciclo iniciarmos a PCR com apenas uma molécula de DNA, ao final teremos duas moléculas. No final do segundo ciclo teremos quatro. No final do terceiro teremos oito moléculas e assim exponencialmente.

 

Ao final dos 36 ciclos teremos bilhões de cópias do DNA que poderão ser analisadas no laboratório. Essa análise ocorrerá através da utilização de géis de Eletroforese.

 

 

Artigo publicado em: 30/12/2018 
_________________________________________

Por Elaine Barbosa de Souza
Graduanda em Ciências Biológicas na Universidade Metodista de São Paulo.


Impressão Google+
Reação em cadeia da polimerase - PCR Temas Relacionados
Bibliografia Indicada:

PCR - The Polymerase Chain Reaction
Autor: Kary B. Mullis
Editora: Birkhauser
Ano: 1994
Temas principais: técnica de PCR, genética, biologia

Veja Também
GALERIA DE IMAGENS Tartaruga marinha: exemplo de réptil
LIVROS DE CIÊNCIAS BIOLÓGICASIndicação de livros de Ciências Biológicas, bibliografia indicada para o estudo de temas de Biologiaver
PESQUISADORESSaiba mais sobre a biografia dos grandes pesquisadores que revolucionaram o mundo da ciência. As grandes...ver
SaúdeInformações e resumos sobre temas relacionados à saúde humana, alimentação, doenças, dicas para levar uma...ver
Dicionário de BiologiaSaiba o significado de várias palavras relacionadas ao estudo de Biologia, definições importantesver